膠體金快速檢測技術(shù)

　　免疫膠體金檢測技術(shù)主要包括斑點免疫金滲濾法(DIGFA)和膠體金免疫層析法(CGEIA)，其基本原理均是以微孔膜為固相載體，包被已知抗原或抗體，加入待測樣本后，經(jīng)微孔膜的滲濾作用或毛細(xì)管虹吸作用使標(biāo)本中的抗體或抗原與膜上包被的抗原或抗體結(jié)合，再通過膠體金標(biāo)記物與之反應(yīng)形成紅色的可見結(jié)果而達(dá)到檢測目的。
　　1、斑點免疫金滲濾法(DIGFA)
　　又叫滴金免疫滲濾試驗(DIFA)，由SpielbergF等于1989年建立，為穿流形式(FlowThrough)。該實驗以微孔膜為固相載體，其上固定有已知特異性抗原或抗體，將其裝入充滿吸水材料的滲濾裝置中，加入待檢標(biāo)本后，經(jīng)濾膜的毛細(xì)管作用或滲濾作用使標(biāo)本中的抗原或抗體與膜上包被的抗體或抗原結(jié)合，再用膠體金結(jié)合物標(biāo)記而達(dá)到檢測目的。反應(yīng)可根據(jù)待測物的不同，選擇不同試驗方法，特別適合于間接法檢測抗體或捕獲法檢測IgM。一般需要3~5步，但所需時間很短，只需3~6min。
　　2、膠體金免疫層析法(CGEIA)
　　該試驗是在免疫滲濾試驗的基礎(chǔ)上建立的一種簡易的檢測技術(shù)，由BeggsM等   先用于人絨毛膜促性腺(HCG)的測定，為側(cè)向橫流形式((LateralFlow)。該技術(shù)也是以微孔膜為固相載體，其原理是將已知的特異性抗原(或抗體)固定于膜上作為檢測帶，膠體金標(biāo)記物干燥在玻璃纖維的結(jié)合釋放墊上，其一端與膜相連，另一端與樣品墊相連膜的另一端連有吸水墊。當(dāng)加人待測樣品(全血、血清、尿或其他體液)后，樣品通過毛細(xì)管的擴散作用向前移動，并通過含標(biāo)記物的玻璃纖維，使標(biāo)記物重新水化，并與膠體金標(biāo)記物相互反應(yīng)，然后一起向前泳動，至檢測線(固定有特異性抗原或抗體)時標(biāo)記物與待測物的復(fù)合物會被檢測線截獲，而出現(xiàn)明顯而直觀的紅色結(jié)果。如果樣品中不含待測物，則會和游離標(biāo)記物一起越過檢測線，到達(dá)質(zhì)控線或試驗終止線，被截獲而出現(xiàn)紅色的對照結(jié)果。多采用夾心法檢測抗原或間接法檢測抗體，也有采用雙孔間接法或反流免疫層析法檢測IgG和IgM對于小分子抗原(如殘留、類固醇的測定等)來說則宜采用競爭法。