動物源性食品 是一個重要的公共衛(wèi)生問題。不僅給畜牧業(yè)生產(chǎn)直接造成損失,也嚴重影響個人、家庭、社會、商業(yè)及整個 的經(jīng)濟利益。因此,為了使用 的動物源性食品, 從飼養(yǎng)到餐桌全過程采取綜合措施,切實做好畜產(chǎn)品 質(zhì)量監(jiān)測,生產(chǎn) 畜產(chǎn)品。由于金標卡板膠體金免疫層析技術操作簡單、檢測時間短、便于現(xiàn)場操作,可以為現(xiàn)場執(zhí)法帶來依據(jù)。
(1)免疫膠體金技術在動物源性食品病毒病診斷中的應用
目前,一些不法商販在食品行業(yè)競爭過程中采用不正當手段,活體帶病動物和食用性動物胭體致病菌的超標、農(nóng)藥獸藥等的殘留、違禁物質(zhì)的添加等問題層出不窮,給食品 問題帶來了嚴重的隱患。由于金標試紙條的診斷具有性和準確性的優(yōu)點,也開始被逐漸應用于畜禽病毒病的現(xiàn)場檢測。
鄭鳴等用膠體金標記抗原和雙抗原夾心法建立的豬瘟病毒抗體檢測免疫層析試紙條,它可以用來豬瘟的臨床診斷,這種檢測方法操作簡單、、特異性好,并且能區(qū)分強弱毒感染;Da等用膠體金標記AIV重組核蛋白制備試紙條,用于檢測AIV抗體,試紙條與血凝(Hv試驗相同,比瓊脂糖凝膠擴散試驗敏感;王慧杰等用膠體金標記PCV一重組Cap蛋白制備膠體金診斷試紙,建立檢測豬圓環(huán)病毒2型Cap抗體的方法。試驗結果表明該試紙?zhí)禺愋愿撸軌騾^(qū)分PCV-2的標準陰、陽性血清。用該試紙在檢測來自不同豬場的165份送檢疑似血清中與美國間接免疫熒光檢測試劑的符合率為85%以上;蔣韜等建立了口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型定型診斷膠體金免疫層析試劑盒,研制的口蹄疫定型試劑盒具有良好的靈敏度,可檢測到7.8萬LD50(1:128稀釋乳鼠毒)的病毒量。同時對陽性及陰性樣品進行3次重復檢測結果相同,具有較好的重復性。特異性試驗證實該方法在檢測口蹄疫臨床癥狀相似病原時無交叉反應,試劑盒對206份已知血清型田間及實驗室樣品的符合率試驗,O、A、AsiaⅠ型和陰性樣本的符合率分別為92.45%、91.66%、92.75%、100%,定型準確率94.58%。此外,如雞新城疫、傳染性法氏囊病、傳染性病、雛鵝新型病毒性腸炎等多種疫病的膠體金診斷試紙條也相繼研制出來,這給畜禽病毒病的現(xiàn)場檢測提供了良好手段。
(2)免疫膠體金技術在動物源性食品病診斷中的應用
動物性食品中常見的致病菌有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、布氏桿菌、霍亂弧菌等。
杜玉萍等以金黃色葡萄球菌菌體抗原免疫家兔獲得多克隆抗血清,采用膠體金免疫層析技術二步法檢測金黃色葡萄球菌,靈敏度為100萬cfu/mL;刁琳琪等用雙抗體夾心法的原理,以膠體金標記一株單抗制備的試紙條可篩選標本中的大腸桿菌O157,試紙條檢測條靈敏度可達10萬cfu/mL,且特異性較高;唐景峰等建立診斷布病的膠體金免疫層析方法體金標記單抗,以多克隆抗體作為檢測線檢測布病,該種方法與PCR檢測符合率為100%;何艷玲等研究了膠體金免疫層析法檢測水產(chǎn)品中O1群霍亂弧菌的方法,該方法檢測食品中O1群霍亂弧菌的靈敏度為10萬cfu/mL,與食品中常見的致病菌無交叉反應,準確性高,適用于食品的檢測。膠體金技術在動物源性食品病診斷中的作用已經(jīng)越來越突出了。
(3)免疫膠體金技術在動物源性食品寄生蟲診斷中的應用
大多數(shù)寄生蟲病是人獸共患性,因此,對畜禽寄生蟲病的早期診斷具有很重要的公共衛(wèi)生學意義。彭運潮等利用雙抗原夾心法,以日本血吸蟲可溶性蟲卵抗原((SEA為檢測抗原研制的試紙條,與ELISA檢測結果比較,兩種方法具有良好的一致性。秦銀霞等以金標卡殼膠體金標SPA和旋毛蟲肌幼蟲ES抗原制備免疫層析試紙條,試紙條對鄉(xiāng)土旋毛蟲、布氏旋毛蟲、偽旋毛蟲及納氏旋毛蟲感染動物血清檢測的陽性率均為100%,適合于動物旋毛蟲感染的血清學診斷。王艷華等將抗弓形蟲抗體和弓形蟲分泌抗原用膠體金標記后,制備檢測弓形蟲抗體的免疫膠體金試紙條,對已知弓形蟲陰性、陽性血清檢測,結果與IHA檢測結果的符合率為82.5%,而且敏感度高于IHA。