膠體金及金標(biāo)卡板膠體金標(biāo)記技術(shù)

　　膠體金標(biāo)記技術(shù)是繼熒光素、放射性同位素和酶標(biāo)記技術(shù)之后又一重要的標(biāo)記技術(shù)。自1971年Faulk和Taylor   將膠體金標(biāo)記技術(shù)引入免疫組織化學(xué)以來(lái)，膠體金標(biāo)記技術(shù)了發(fā)展，因其具有其他標(biāo)記技術(shù)所沒(méi)有的特性，正在被廣泛地運(yùn)用于生物醫(yī)學(xué)、臨床診斷等。近些年，在膠體金標(biāo)記技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的膠體金免疫診斷技術(shù)已成為而又敏感的免疫檢測(cè)技術(shù)之一，具有廣闊的應(yīng)用前景?；诿嘎?lián)免疫吸附試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、單克隆抗體技術(shù)、層析技術(shù)、膠體金技術(shù)和新材料技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的膠體金免疫診斷技術(shù)在目前的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中主要有兩種：斑點(diǎn)免疫金滲濾法和膠體金免疫層析法。而金標(biāo)卡板膠體金免疫層析技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、、操作人員無(wú)需技術(shù)培訓(xùn)、無(wú)需儀器設(shè)備、試劑穩(wěn)定和便于保存等特點(diǎn)，已成為“床邊檢驗(yàn)”(PointofCareTesting)的主要方法之一。
　　膠體金是指氯金酸(HAuCl4)在還原劑的作用下聚合成大小的金顆粒，形成帶負(fù)電的疏水性膠溶液，由于靜電作用而形成穩(wěn)定膠體狀態(tài)。膠體金溶液中的分散相(金顆粒)大小在1~150nm，屬于多相不均勻體系，膠體顏色從橘紅色向紫紅色過(guò)渡。膠體金顆粒由一個(gè)基礎(chǔ)金核(原子金)及包圍在外圍的雙離子層構(gòu)成，內(nèi)層為AuCl2-負(fù)離子層，外層為分散在溶液中的H+，由此產(chǎn)生的靜電引力維系膠體的穩(wěn)定狀態(tài)。膠體金的制備   常用的方法是化學(xué)還原法，常用的還原劑有檸檬酸三鈉、靴酸、抗壞血酸、硫氰酸鹽等。根據(jù)還原劑類(lèi)型和還原作用的強(qiáng)弱，可以控制產(chǎn)生出0.8~150nm的膠體金，還原劑用量越大，制各的金顆粒直徑越小。
　　膠體金顆粒具有高電子密度、在弱堿性條件下其表面帶有負(fù)電荷的特性，能夠和蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)牢固地結(jié)合在一起。據(jù)報(bào)道，當(dāng)金顆粒聚集密度達(dá)到1000萬(wàn)個(gè)/m㎡，即可出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的粉紅色斑點(diǎn)。膠體金標(biāo)記實(shí)際上是蛋白質(zhì)等高分子物質(zhì)在膠體金顆粒表面的包被過(guò)程。由于金顆粒與蛋白質(zhì)之間是靜電結(jié)合，此過(guò)程并不影響蛋白質(zhì)分子的生物學(xué)特性。因金顆粒對(duì)蛋白有的吸附力，可以與葡萄球菌A蛋白、抗體、毒素、酶、牛血清白蛋白等非共價(jià)結(jié)合，已成為基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)驗(yàn)中的重要工具。