膠體金在水產(chǎn)動物藥物殘留檢測中的應(yīng)用

　　近年來，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大和產(chǎn)量的不斷增多，及一些化學(xué)合成被廣泛用于的防治，或添加于飼料中以水生動物的生長。在發(fā)揮積極作用的同時，部分或其代謝產(chǎn)物則殘留在水生動物的體內(nèi)，產(chǎn)生了水產(chǎn)品的殘留。雖然水產(chǎn)品的殘留量較低，但是通過食物鏈的長期富集，對人類健康卻具有很大的危害，并己成為人類健康的一大隱形殺手。
　　四環(huán)素類是一種廣譜，該類濫用可引起其在動物的肌肉、奶、肝臟中的殘留，嚴(yán)重危害人類健康。檀尊社等將抗四環(huán)素單克隆抗體一膠體金復(fù)合物包被在膠體金結(jié)合墊上，并將人工合成的四環(huán)素抗原包被在硝酸纖維素的檢測線(T線)，采用免疫競爭法建立了用于檢測水產(chǎn)品中四環(huán)素類殘留含量的膠體金免疫層析檢測試劑條。其靈敏度可達(dá)100ng/mL，整個檢測過程僅需5~10min，并且與金霉素、土霉素、霉素等四環(huán)素族有的交叉反應(yīng)，而與沙丁胺醇、萊克多巴胺等其他獸藥無交叉反應(yīng)。因此可同時檢測四環(huán)素族中幾種主要，并可作為四環(huán)素殘留現(xiàn)場監(jiān)控的篩檢手段。
　　氯霉素是一種   廣譜，常用于動物各種傳染性的。但其對人體有嚴(yán)重的毒副作用。目前美國和歐共體己禁止在食用性動物中使用氯霉素，并規(guī)定在動物源性食品中不得檢出。張燕等用氯霉素多克隆抗體標(biāo)記膠體金，將人工合成的氯霉素抗原包被在NC膜的檢測線上，羊抗兔抗體包被在指控線上，采用競爭法建立了檢測淡水魚及牛乳中的氯霉素殘留方法。靈敏度可達(dá)1μg/L，并且與其他常見獸藥均無交叉反應(yīng)，可作為水產(chǎn)品中氯霉素殘留現(xiàn)場大量篩選的手段。鑒于此有學(xué)者用ELISA和GICA檢測方法對水產(chǎn)品種氯霉素殘留進(jìn)行了檢測。經(jīng)測定，GICA的檢測限為1.000μg/kg，對ELISA的陰性符合率為94.7%，陽性符合率為92.3%，總符合率達(dá)到92.5%，基本滿足適合水產(chǎn)品中氯霉素殘留的現(xiàn)場篩選的要求。
　　硝基呋喃類(Nitrofurans)是人工合成的廣譜，主要包括呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮，曾經(jīng)被廣泛用于在畜禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖中防治性和提高飼料利用率。但近年來研究顯示，硝基呋喃類及其代謝物存在致癌致突變的危害，嚴(yán)重危害人類健康。柳愛春等在酸性條件下，以4-撥基苯甲醛為衍生化試劑分別與4種硝基呋喃類代謝物(AOZ、SEM、AMOZ和AHD)反應(yīng)制成相應(yīng)半抗原：CPAOZ、CPSEM、CPAMOZ和CPAHD，采用碳二亞胺法將半抗原與牛血清蛋白偶聯(lián)合成人工抗原：CPAOZ-BSA、CPSEM-BSA、CPAMOZ-BSA和CPAHD-BSA，在此基礎(chǔ)上研制成4種硝基呋喃代謝物膠體金試劑條，   低檢出限分別為0.5、1.0、1.0和2.0μg/kg，相互間的交叉反應(yīng)率小于0.1%。Xu和Liu等采用免疫競爭法建立了用于檢測動物源性呋喃妥因殘留的膠體金免疫層析試紙條，該試紙條具有較高的特異性，其靈敏度為10ng/mL，在15min之內(nèi)就能檢測到結(jié)果，成本低，方便，，尤其適合在野外的現(xiàn)場檢測。
　　磺胺類(SulfonamIdes)是一類用于預(yù)防與感染性的化學(xué)性。目前中國、歐盟、美國、日本等   均將磺胺類列為動物飼養(yǎng)過程中限制使用的。韓靜，劉恩梅等將對磺胺類具有廣譜特異性的多克隆抗體一膠體金復(fù)合物噴涂在玻璃纖維上，并將人工合成的包被抗原(SAs-OVA)、羊抗兔二抗分別固定在NC膜的T線和C線上，采用免疫競爭法建立了一種用于檢測動物源性食品中五種磺胺類，磺胺異噁唑(SIZ)、磺胺噻唑(STZ)、磺胺對甲氧嘧啶(SME)、磺胺甲二唑(SMT)，磺胺氯噠嗪(SCPA)殘留的膠體金免疫層析方法。該方法可檢測卿魚肉中磺胺類的殘留，檢測限為0.01μg/kg，檢測時間小于10min，可作為磺胺類多殘留現(xiàn)場監(jiān)控的篩檢手段。王錢等同樣采取競爭法建立了一種檢測組織樣品中磺胺甲噁唑殘留的膠體金試紙條，靈敏度可達(dá)20μg/L，檢測時間僅為3~5min，可作為組織中磺胺甲噁唑殘留現(xiàn)場監(jiān)控的篩檢手段。
　　氟喹諾酮類(fhtomquinolones，F(xiàn)Qs)藥是一類人工合成藥，己經(jīng)成為水產(chǎn)養(yǎng)殖中普遍使用的   抗感染之一，被廣泛應(yīng)用于各種水產(chǎn)動物的預(yù)防和。馮婷婷等用膠體金標(biāo)記抗氟喹諾酮類的廣譜性單克隆抗體，將諾氟沙星-卵清蛋白噴涂在檢測線上，羊抗小鼠二抗噴涂在質(zhì)控線上，建立了一種檢測能同時檢測環(huán)丙沙星、恩諾沙星等11種氟喹諾酮類的膠體金試紙條，滿足了在蝦和雞肉中氟喹諾酮類殘留現(xiàn)場大量篩查的要求。
　　孔雀石綠(MG)，在水產(chǎn)上常用作水霉病、鰓霉病、小瓜蟲病等，但由于其具有高毒素、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用，2002年我國己將孔雀石綠列為水產(chǎn)養(yǎng)殖禁用。但由于其廉，且尚無較好的替代藥，目前仍有許多養(yǎng)殖戶在違規(guī)使用。桑麗雅等采用競爭法，即用膠體金標(biāo)記孔雀石綠單克隆抗體，將人工合成的包被抗原(MG-OVA)和羊抗鼠哪分別包被在NC膜的檢測線和質(zhì)控線上，建立了檢測水產(chǎn)品中孔雀石綠殘留的膠體金試紙條，該試紙條對水產(chǎn)品中孔雀石綠和隱性孔雀石綠的   低檢出限分別為1μg/kg和3μg/kg，檢測結(jié)果與液相一串聯(lián)質(zhì)譜法的檢測結(jié)果一致，滿足基層現(xiàn)場檢測中的需要。趙春城等同樣采用競爭法建立了孔雀石綠代謝物一無色孔雀石綠的膠體金試紙條，   低檢出限為20μg/L，但與孔雀石綠有20%的交叉反應(yīng)率。與ELISA試劑盒檢測結(jié)果的符合率為90%，基本滿足現(xiàn)場檢測的需要。