膠體金免疫層析(ColloidalGoldImmunochroma-tographyAssay,GICA)技術是以膠體金作為標記物檢測特定抗體或抗原的一種新型的固相免疫標記技術。金標卡殼GICA技術將膠體金標記技術、免疫檢測技術和層析分析技術等多種檢測方法地結合在了一起,是繼熒光素、酶標記和放射性同位素技術之后的又一重要的新型免疫標記技術。目前,GICA技術已被廣泛應用于妊娠檢測、病原體抗體或抗原檢測、相關的蛋白檢測等。雖然GICA技術在動物診斷上的應用起步較晚,但發(fā)展,金標卡殼GICA技術已經成為目前動物醫(yī)學檢測中 、敏感的免疫學檢測方法之一。由于該技術具有操作簡便、特異、靈敏和等優(yōu)點,因此特別適合廣大的基層獸醫(yī)人員使用,適用于大批量檢測以及大面積普查等,具有廣闊的應用前景和巨大的發(fā)展?jié)摿Α?br/> 1、膠體金 膠體金又叫金溶膠,是氯金酸在還原劑如硼氫化鈉、白磷、過氧化氫、乙醇、蹂酸、構椽酸鈉、抗壞血酸等的作用下,聚合成特定大小的金顆粒。金顆粒在堿性溶液中其表面帶有負電荷,金顆粒之間的靜電排斥力使在溶液中形成穩(wěn)定的膠體。如果溶液中存在較大的分子,比如蛋白質分子時,蛋白質分子表面的正電荷就會與金顆粒表面的負電荷結合,蛋白質分子上就會吸附金顆粒,并且蛋白質的生物活性依然不會受到影響。膠體金溶液會隨著溶液濃度的升高其顏色將由桔紅色變?yōu)樽霞t色。正是由于膠體金具有化學性質穩(wěn)定、能夠吸附以及顏色變化的特性,使得膠體金具備了成為檢測標記物的特點。
2、膠體金免疫技術 膠體金免疫技術是以膠體金作為檢測標記物,應用于抗原抗體反應的一種新型免疫檢測技術。主要利用了金顆粒的高電子、特性,在顯微鏡下可見金標蛋白結合處有黑褐色的顆粒,當這些標記物大量聚集在相應的配體處時,呈現出肉眼可見的粉紅色或紅色斑點,因而被用于定性或半定量的免疫檢測中。
3、膠體金免疫層析技術 GICA技術是將膠體金標記技術、免疫檢測技術以及層析分析技術等多種檢測方法結合在一起的一種固相標記免疫檢測技術。其原理是以條狀纖維層析材料為固相,將已知的特異性抗原(或抗體)固定于膜的某一區(qū)帶(檢測帶),膠體金標記物干燥在玻璃纖維的結合釋放墊上,一端與膜相連,另一端與樣品墊相連,膜的另一端連有吸水墊。檢測時,在樣品墊處加入待檢樣品(血清、全血、尿或其它體液)后,樣品將沿層析方向向前移動,樣品中的待檢物會與層析材料上針對該待檢物的受體(抗原或抗體)結合,發(fā)生高親和性和高特異性的免疫反應。層析過程中,形成的免疫復合物將被截留或富集在檢測帶上,標記物(膠體金)會呈現直觀的顯色試驗現象。若樣品中不含待檢物,則會同游離標記物一起到達控制線。