金標(biāo)卡板膠體金的原理及特點(diǎn)

　　金標(biāo)卡板免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù)。膠體金顆粒之間，靠靜電作用形成一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，也稱金溶膠。金標(biāo)卡板膠體金標(biāo)記就是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。吸附機(jī)理是膠體金顆粒表面的負(fù)電荷與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)靜電吸附而形成牢固結(jié)合。用還原法可以方便地通過氯金酸制備各種不同粒徑，不同顏色的膠體金顆粒這種球形的粒子對蛋白質(zhì)有的吸附功能，可以與葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、、、牛血清白蛋白多膚等非共價結(jié)合，因而在基礎(chǔ)研究和檢驗(yàn)檢疫中成為非常有用的工具。膠體金是通過在氯金酸水溶液中加入還原劑使之還原并聚集形成膠體金粒子而形成的，通過改變還原劑的種類和劑量，可以控制所還原出的粒子大小，即粒子的大小取決于反應(yīng)溶液中還原試劑和還原底物的量。還原劑濃度越高，底物濃度也越高，氯金酸水溶液的還原中心就相應(yīng)增多，使得產(chǎn)生的膠體金粒子數(shù)量增多，體積變小。粒子直徑每增加1倍，粒子數(shù)量便變?yōu)樵瓉淼?/8。目前，制備膠體金的方法有許多種，根據(jù)時間的先后，依次為抗壞血酸還原法、檸檬酸三鈉還原法、乙醛超聲波還原法、放射性膠體金法、硼氫化鈉還原法、鞣酸-檸檬酸三鈉還原法、白磷還原法、改良型白磷還原法和微波制備膠體金法。根據(jù)不同的制備方法，可以制備出直徑1~500nm的膠體金粒子，但作為免疫標(biāo)記探針，其直徑一般為3~50nm。免疫膠體金顆粒具有高電子的特性，在顯微鏡下金標(biāo)蛋白結(jié)合處，可見黑褐色顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時，肉眼可見紅色或粉紅色斑點(diǎn)，因而，可用于定性或半定量的免疫檢測。
　　金標(biāo)卡板免疫膠體金技術(shù)是四大免疫標(biāo)記技術(shù)之一，在生物醫(yī)學(xué)等各研究，特別是在診斷學(xué)中被廣泛應(yīng)用。該技術(shù)與其他三大標(biāo)記技術(shù)，即熒光素、放射性同位素和酶技術(shù)相比，有以下特點(diǎn)：①膠體金易制備，廉，成本較低；②膠體金顆粒大小可以控制，顆粒均勻，可進(jìn)行雙重和多重標(biāo)記，同時檢測多種物質(zhì)；③免疫膠體金對組織細(xì)胞的非特異性吸附作用小，具有高度特異性和高敏感性；①不僅可用于光鏡，也可用于透射電鏡和掃描電鏡；⑤膠體金本身有鮮艷的酒紅色，檢測結(jié)果直接用顏色顯示，肉眼判斷容易，無需儀器設(shè)備，直觀，特別適合于廣大基層單位、醫(yī)院、野外作業(yè)人員以及偏遠(yuǎn)地區(qū)等應(yīng)用；⑥簡化了煩瑣的操作過程，地縮短了檢測時間，同時也減小了操作誤差。